Научный журнал
Современные наукоемкие технологии
ISSN 1812-7320
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 1,007

МЕТОДИКА АНАЛИЗА КАПСУЛИРОВАННОЙ ФОРМЫ ПРОТИВОВИРУСНОГО СРЕДСТВА ТРИАЗАВИРИН

Шаблакова А.С. 1 Ковалев И.С. 1 Русинов В.Л. 1 Уломский Е.Н. 1 Петров А.Ю. 2
1 ФГАОУ ВПО «Уральский федеральный университет им. первого Президента России Б.Н. Ельцина»
2 ГОУ ВПО «Уральская государственная медицинская академия Минздравсоцразвития России»
Одним из этапов создания лекарственной формы является разработка методов анализа действующих веществ. В результате предыдущих исследований получена капсулированная форма противовирусного препарата триазавирина. В качестве его метода анализа предложена методика с применением высокоэффективной жидкостной хроматографии на хроматографе «Agilent 1200». Условия анализа триазавирина подобраны экспериментальным способом. Хроматографическая колонка Zorbax eclipse XDB C18 пригодна для проведения анализа. Следует провести валидацию метода анализа для дальнейшего его включения в проект фармакопейной статьи. По результатам эксперимента определялась точность и линейность методики. Проводился анализ пяти растворов с концентрациями от 60 до 135 % основного вещества. Относительное стандартное отклонение составило 1,59 %. Методика определения триазавирина признана точной по критерию сходимости результатов. Линейная зависимость между показателями концентраций триазавирина и площадями пиков выражается уравнением Y=18,076C-833,857. Коэффициент корреляции составляет 0,99553.
триазавирин
ВЭЖХ
капсулы
1. Балинова B.C. Статистика в вопросах и ответах: Учеб. пособие. – М.: ТК. Велби, Изд-во Проспект, 2004. – 344 с.
2. Брунилин Р.В., Орлинсон Б.С., Радченко С.С. Хроматографические методы анализа: Учебное пособие. – Волгоград: ВолгГТУ, 2008. – 48 с.
3. Государственная Фармакопея СССР ГФ Х1, 1987 г.
4. Краснов Е.А., Блинникова А.А.Современные хроматографические методы (ГЖХ, ВЭЖХ) в фармацевтическом анализе: Учебное пособие. – Томск: Сибирский государственный медицинский университет, 2006. – 154 с.
5. Медик В.А., Токмачев М.С. Математическая статистика в медицине: Учебное пособие. – М.: Финансы и статистика, 2007. – 800 с.

Триазавирин – оригинальное отечественное лекарственное вещество противовирусного действия. Ведется разработка твердых лекарственных форм препарата. На сегодняшний момент зарегистрирована капсулированная форма триазавирина. Одним из этапов создания лекарственных препаратов является разработка методов его качественного и количественного анализа. Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) широко применяется в фармацевтическом анализе благодаря своей высокой чувствительности и эффективности разделения, мягким условиям анализа, автоматизации проведения испытаний [2, 4]. Цель исследования – подтвердить возможность использования обращено-фазовой жидкостной хроматографии для определения триазавирина в капсулированной лекарственной форме.

Хроматографический эксперимент проводился на хроматографе «Agilent 1200», снабженном спектрофотометрическим детектором на диодной матрице.

Условия хроматографирования триазавирина:

1) хроматографические колонки Zorbax eclipse XDB C18 5 мкм 4.6·150 мм и Separon SGX NH2 7мкм 4,6·250;

2) элюент «ацетонитрил-0,025М водный раствор ацетата натрия» в соотношении 10:90 по объему при использовании обеих колонок;

3) расход элюента 850 мкл/мин;

4) длина волны детектирования 215 нм;

5) объем пробы 5 мкл;

6) проба: 0,025 г (точная навеска) модельной смеси, растворенной в 25 мл элюента;

7) температура окружающей среды 22 ±2 °С.

Обсуждение результатов. Пригодность хроматографических колонок для количественного определения триазавирина.

Первоначально проводился выбор хроматографической колонки по разделяющей эффективности. Для каждой из них рассчитывалось число теоретических тарелок (ЧТТ) как функция времени удерживания и ширины пика основного компонента (табл. 1) [4].

Таблица 1

Эффективность хроматографических колонок

Хроматографическая колонка

Zorbax eclipse XDB C18

5 мкм 4.6*150 мм

Separon SGX NH2

7мкм 4,6*250

Эффективность,N

34438

19600

Разрешение,R

38,22

16,52

Эффективность хроматографической колонки N, рассчитанная по пику основного компонента (триазавирин), должна быть не менее 3500 теоретических тарелок, разрешение R между пиком 3-метилтио-5-амино-1,2,4-триазола (основная примесь) и пиком триазавирина должно составлять не менее 5,0 мин. [3].

Дальнейшая апробация методики количественного определения триазавирина в капсулированной форме проводилась на хроматографической колонке Zorbax eclipse XDB C18, как наиболее эффективной. Колонка Separon SGX NH2 оказалась непригодна для анализа триазавирина из-за нестабильности, в сторону уменьшения времен удерживания.

Определение метрологических характеристик методики количественного определения триазавирина. Точность аналитической методики (precision) оценивалась по сходимости результатов (precision) определения триазавирина в модельных смесях в концентрации, близкой к номинальной (0,25 г). Исследовалось 5 растворов триазавирина, приготовленных независимо друг от друга в соответствии с тестируемой методикой. Каждый раствор хроматографировали 3 раза. По результатам эксперимента определялись следующие метрологические характеристики сходимости методики: средний результат (xср), относительное стандартное отклонение (srср), относительный доверительный интервал среднего результата (εср), средняя относительная погрешность определения (erср). Расчетное значение t-критерия Стьюдента должно быть меньше табличного или srср ≤2,0 % (табл. 2) [1, 5].

Таблица 2

Определение точности методики количественного определения триазавирина

р-ра

Площадь пика, S

Xiср,г

Хср,г

srср, %

εср

erср, %

1

2

3

4

5

6

7

1

1238,097

1231,887

1243,201

0,2627

0,2566

1,59

0,009

3,5

2

1186,699

1193,708

1198,989

0,2584

       

3

1198,971

1204,093

1203,003

0,2527

       

4

1214,503

1202,053

1209,061

0,2557

       

5

1168,424

1169,408

1160,365

0,2534

       

Аналитическая методика определения триазавирина признана точной по критерию сходимости результатов.

Особое внимание уделялось определению линейности методики (linearity)– способности методики в диапазоне применения давать величины сигнала Yi (площадь пика) прямо пропорциональные концентрации Сi определяемого вещества. Для оценки линейности готовилось 7 растворов с концентрациями триазавирина, охватывающими всю область действия методики (60-135 %)[5]. Данные позволяют судить о стойкой линейной зависимости между показателями концентраций триазавирина и площадями пиков (рисунок).

sablak1.wmf

Корреляция концентраций триазавирина и площади пиков. R=0,99553

Вывод

Подтверждена возможность количественного определения триазавирина по выбранной аналитической методике на жидкостном хроматографе серии «Agilent 1200».


Библиографическая ссылка

Шаблакова А.С., Ковалев И.С., Русинов В.Л., Уломский Е.Н., Петров А.Ю. МЕТОДИКА АНАЛИЗА КАПСУЛИРОВАННОЙ ФОРМЫ ПРОТИВОВИРУСНОГО СРЕДСТВА ТРИАЗАВИРИН // Современные наукоемкие технологии. – 2014. – № 2. – С. 93-95;
URL: https://top-technologies.ru/ru/article/view?id=33659 (дата обращения: 03.12.2022).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074