Scientific journal
Modern high technologies
ISSN 1812-7320
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,940

Среди неспецифических факторов, индуцирующих апоптоз, особое место занимает температура (Т), которая изменяется в физиологических условиях существования организма. Цель работы - изучение влияния Т на апоптоз лимфоцитов периферической крови. Кровь, взятую у 32 пациентов с патологией кожи, гепаринизировали и отстаивали при Тк - 18-210С. Термостатировали взвесь лимфоцитов, добавляли к ней равные объемы акридинового оранжевого и этидиума бромида в фосфатном буфере, затем микроскопировали под люминесценцией. Подсчитывали на 100 клеток число лимфоцитов: типичных, апоптических (клетки меньшего размера и группы фрагментов клеток, зеленая флуоресценция) и некротических (клетки большего размера, красная флуоресценция).

Установлено, что содержание лимфоцитов у пациентов составило 3,3±0,48х109/л (38±4,8%), и соответствовало норме. В этих условиях апоптических лимфоцитов было 8,7±2,3% (фрагментированных клеток - 6,4±2,1%, малого размера - 2,3±1,2%), а некротических - 3,6±1,6%. Корреляция между их числом и Тк - г=0,19, р>0.25; между уровнем апоптоза и Тк значима (г=-0.48, р<0,02). Первые морфологические признаки апоптоза наблюдаются через 2-3 часа после стимуляции. Визуально отчетливо идентифицируются две его стадии: первичное уменьшение размера клетки и затем образование скоплений апоптических телец (фрагментов клетки), что позволяет разграничить апоптоз, стимулированный через разное время после забора крови. По-видимому, клетки малого размера встали на путь апоптоза позже, чем лимфоциты, достигшие стадии апоптических телец, и представляют собой фрагменты клеток, апоптоз которых стимулирован вскоре после забора крови. Наиболее вероятным индуктором их гибели может быть уменьшение температуры до Тк. Апоптоз клеток малого размера стимулирован изменениями других условий (парциальных напряжений О2 и СО2), несмотря на возвращение лимфоцитов в среду с Т=37°С спустя 40 мин после забора крови.

Показано, что коэффициент корреляции между Тк и числом фрагментированных лимфоцитов (г=-0,64, р<0,01) выше по сравнению с таковым для общего числа апоптических клеток. Помимо физико-химических факторов, апоптоз индуцируют биохимические стимулы (например, цитокины и ионы 2-валентных металлов). Апоптоз лимфоцитов in vitro стимулируется Тк, все найденные корреляции обусловлены этим явлением. Снижение Тк на 10С ведет к росту уровня апоптоза на 2,1±0,37%, а пребывание лимфоцитов при Тк-15-18°С даёт появление большего числа фрагментированных клеток, чем при Тк-19-21°С (соответственно 10,6±4,3% и 4,8±1,6%). Регрессионный анализ показал, что максимальная Т, ниже которой стимулируется апоптоз, составляет 22,1±0,51°С.

Таким образом, уровень апоптоза лимфоцитов периферической крови увеличивается с уменьшением Т<200С, что имеет физиологическое значение. Т кожи может быть ниже Т тела на 10-15°С и более, достигая значений Тк и ниже. Время прохождения лейкоцитов через капилляры обычно не превышает нескольких минут, время их контакта с участками тела, имеющими Т<20°С, обычно ограничено. Пребывание на холоде может стимулировать апоптоз лимфоцитов периферической крови, уровень которого окажется тем выше, чем ниже Т среды и чем больше время охлаждения. Температуры порядка Тк стимулируют гибель лимфоцитов in vivo, что может сказаться на состоянии иммунитета и стать причиной простудных заболеваний.