Целью работы явилась разработка методов получения и применения иммобилизованных в магнитные носители микроорганизмов для очистки сточных вод.
Объектом исследования явилась выделенная нами из активного ила аэротенка чистая культура Pseudomonas picketti - микроорганизма, преобладающего в активном иле очистных сооружений острова Голодный Волгоградской области.
В качестве магнитного носителя для P.picketti использовали сорбент, приготовленный по методике разработанной Ставропольским НИПЧИ [2]. Способ получения сорбента включал активацию носителя и ковалентное связывание с ним биологического лиганда. В качестве носителя применяли смесь алюмосиликата с магнитным порошком, который модифицировали 0,3-0,4%-ным раствором полиглюкина и после высушивания активировали вторичным алкилсульфатом натрия.
Все используемые по данному способу препараты доступны и недороги, способ обеспечивает простую и достаточно экологически безопасную технологию получения сорбентов, в том числе и с магнитными свойствами.
В процессе исследования были подобраны оптимальные условия иммобилизации клеток - временя иммобилизации и температурный режим иммобилизации. Нами была изучена возможность иммобилизации P.picketti при температуре 5, 21, 37, 410C. При изучении времени иммобилизации была апробирована длительность 1, 2, 4, 6 и 18 ч. Результаты экспериментов учитывали фотоколориметрическим методом по измерению оптической плотности после односуточного культивирования системы иммобилизованных клеток в экспериментально подобранной жидкой питательной среде. Контролем служили интактные клетки, культивированные в аналогичных условиях. Результаты экспериментов представлены в таблице 1.
Результаты, представленные в таблице, свидетельствуют, что оптимальными условиями для проведения иммобилизации P.picketti являются температура 370C и длительность иммобилизации 2 часа.
Таблица 1. Результаты подбора оптимальных условий иммобилизации клеток P.picketti
|
Длительность иммобилизации, час |
Температура, 0С |
Концентрация биомассы, х109м.к./мл |
% прироста биомассы |
|
1 |
5 21 37 41 |
0,01 0,65 1,05 0 |
1,30 52 64 0 |
|
2 |
5 21 37 41 |
0,01 1,75 2,40 0 |
1,30 104 112 0 |
|
4 |
5 21 37 41 |
0 2,00 1,50 0 |
0 86,11 70,83 0 |
|
6 |
5 21 37 41 |
0 1,90 1,25 0 |
0 80,65 65,23 0 |
|
16 |
5 21 37 41 |
0 1,70 0,01 0 |
0 77,78 1,30 0 |
Таким образом, в процессе экспериментальных исследований была разработана методика иммобилизации микроорганизмов P.picketti в алюмосиликатные магнитные сорбенты и подобраны временные и температурные условия иммобилизации микробных клеток.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
- Скрябин Г.К., Кощеенко К.А. Иммобилизованные клетки микроорганизмов //Биотехнология. - 1984. - С.70-77.
- Ефременко В.И. Магносорбенты в микробиологических исследованиях. - Ставрополь: Ставрополье, 1996. - 131с.