Научный журнал
Современные наукоемкие технологии
ISSN 1812-7320
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,916

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ В ИЗУЧЕНИИ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ ВАЗОКОНСТРИКЦИИ

Бебякова Н.А. 1, 2 Феликсова О.М. 1, 2 Хромова А.В. 1, 2
1 ГБ0У ВПО «Северный государственный медицинский университет»
2 Институт медико-биологических исследований ФГАОУ ВПО С(А)ФУ им. М.В.Ломоносова
1. Бебякова Н.А., Левицкий С.Н., Командресова Т.М., Шабалина И.А К механизмам антиконстрикторного эффекта даларгина. // Вестник Северного (Арктического) федерального университета. Серия: Естественные науки. - 2012. - №1. - С.45-49.
2. Бебякова Н.А., Фадеева Н.А., Феликсова О.М., Хромова А.В. Гендерные особенности гемодинамических реакций на нагрузку / / Фундаментальные исследования. - 2013. - №5 (часть 1). - С.33-37
3. Затейщиков Д.А., Минушкина Л.О., Кудряшова О.Ю. Функциональное состояние эндотелия у больных эндотелиальной гипертензией и ишемической болезнью сердца // Кардиология. - 2000. - №6. - С. 14-16.)
4. Кузнецова Т.Ю. Генетические механизмы артериальной гипертензии: состояние проблемы //Регионарное кровообращение и микроциркуляция.- 2006.- т. 5.- № 4.- с. 75 - 89
5. Мартиросов Э.Г. Методы исследования в спортивной антропологии. – М.: Физкультура и спорт, - 1982. - 199 с.
6. Маянская С.Д., Антонов А.Р., Попова А.А. и др. Маркеры дисфункции эндотелия сосудов у лиц молодого возраста с латентной артериальной гипертонией // Российский кардиологический журнал. - 2004. - №6. - С. 28-32
7. Пархоменко А.Н. и др. Полиморфизм Т-786С промотора гена эндотелиальной NO-синтазы: связь с эффективностью тромболитической терапии у пациентов с острым инфарктом миокарда.// Украiнський медичний часопис, 2008. - №4(66). С. 20-23)
8. Nakayama M., Yasue H., Yoshimura M. et al. T-786C mutation in the 5'-flanking region of the endothelial nitric oxide synthase gene is associated with coronary spasm // Circulation. - 1999. - Vol. 99. - P. 2864-2870.
9. Wang X.L., Wang J. (2000) Endothelial nitric oxide synthase gene sequence variations and vascular disease. Molec. Genet. and Metabol., 70(4): 241–251)

Проанализированы результаты ПЦР-анализа в промоторе гена NO-синтазы на наличие Т-786С полиморфизма и ассоциация его с типом гемодинамической реакции на нагрузку у 168 юношей. В группе лиц с гипертонической реакцией на нагрузку частота встречаемости генотипа СС составила 23,5%, в то время как у лиц с нормотонической реакцией – только у 6,8%. Частоты генотипов ТТ составили 32,4% и 50,5 % соответственно. Гетерозиготный генотип СТ встречался у 44,1% лиц с гипертонической реакцией и у 42,7% лиц с нормотонической реакцией. Таким образом было выявлено, что генотип СС статистически значимо (р<0.05) чаще встречается у лиц с гипертонической реакцией на нагрузку. Для лиц с данным генотипом характерен более высокий тонус периферических сосудов.

Работа поддержана грантом РФФИ, проект № 14-04-98823

В современных физиологических исследованиях наряду с классическими методами широко применяются различные варианты молекулярно-генетических исследований, что расширяет возможности анализа полученных данных и способствует более полному пониманию взаимосвязи между структурой и функцией различных систем [4]..

В последнее время проводятся многочисленные генетические исследования генов-кандидатов, кодирующих функцию основных физиологических систем, участвующих в регуляции основных параметров системы кровообращения, в том числе и в регуляции сосудистого тонуса. Важная роль в регуляции периферического сосудистого тонуса принадлежит оксиду азота (NO). Экспериментальными и клиническими исследованиями показано что дефицит продукции NO приводит к периферической вазоконстрикции [1,6].

Различная активность выработки NO связана с полиморфизмом гена NO-синтазы, в первую очередь, в зоне промотора гена. К настоящему моменту в этом гене выявлен полиморфизм в 11 местах, 8 их которых изучали в качестве фактора риска развития сердечно-сосудистой патологии. Однако анализ связей этих полиморфизмов как с базальным уровнем оксида азота, так и с повышенным риском сердечно - сосудистой патологии показал противоречивые результаты [7,9].

Цель работы заключалась в выявлении связи полиморфизма Т-786С промотора гена NO-синтазы с риском периферической вазоконстрикции у практически здоровых лиц в возрасте 18-22 лет, постоянно проживающие на территории Европейского Севера. Всего обследовано 168 мужчин. Критериями исключения являлись: наличие у обследуемых острых воспалительных заболеваний, хронических заболеваний внутренних органов, в том числе и в стадии стойкой ремиссии, ожирения.

Материалы и методы

У всех обследуемых было проведено молекулярно-генетическое исследование, на которое было получено информируемое согласие. ДНК выделяли из клеток венозной крови при помощи набора «ДНК-экспресс кровь» («Литех»). Детекцию полиморфизма Т-786С в гене NOS3 определялись методом полимеразной цепной реакции на базе генетической лаборатории ЦНИЛ СГМУ с использованием реактивов фирмы «Литех» (Москва). Оценку концентрации оксида азота в сыворотке крови по суммарной концентрации стабильных метаболитов нитратов/нитритов проводили биохимическим методом с использованием набора «Total NO/Nitrite/Nitrate («R&D Systems», США)». Тонус сосудов оценивался по данным периферической реовазографии с использованием индекса периферического сопротивления сосудов (ИПС). Параметры гемодинамики определялись до и после пробы с дозированной физической нагрузкой по Мартине-Кушелевскому [5] с выделением типов реакции сердечно-сосудистой системы. Все результаты обследования обработаны вариационно-статистическими методами с использованием программы SPSS 17.0. Нормальность распределения количественных признаков проверялась с использованием критериев Колмогорова-Смирнова и Шапиро-Уилка. Различия считали статистически значимыми при р < 0,05.

Результаты

Изучение среди обследованных лиц распределения генотипов по изучаемому полиморфизму гена NOS3 выявило следующее соотношение нормальных гомозигот (ТТ), гетерозигот (ТС) и патологических гомозигот (СС) – 42.6%, 46.1% и 11.3% соответственно. Таким образом, наиболее редким генотипом является генотип СС, который по данным ряда авторов ассоциирован с риском развития ИБС, артериальной гипертензии и коронароспазмом [3,8]. Наблюдаемое распределение частоты выявляемости генотипов соответствовало закону равновесия Харди-Вайнберга.

Все обследуемые были разделены на группы в зависимости от типа реакции на нагрузку. Гипертоническая реакция на нагрузку была выявлена у 23 % обследуемых, нормотоническая у – 73 %. Гипотоническая и дистоническая встречалась у 4 % [2].

В группе лиц с гипертонической реакцией на нагрузку частота встречаемости генотипа СС составила 23,5%, в то время как у лиц с нормотонической реакцией – только у 6,8%. Частоты генотипов ТТ составили 32,4% и 50,5 % соответственно. Гетерозиготный генотип СТ встречался у 44,1% лиц с гипертонической реакцией и у 42,7% лиц с нормотонической реакцией. Таким образом было выявлено, что генотип СС статистически значимо чаще (р<0.05) встречается у лиц с гипертонической реакцией на нагрузку.

Для лиц с генотипом СС характерна более выраженная периферическая вазоконстрикция, о которой говорят высокие значения индекса периферического сопротивления после нагрузки (р<0.05) по сравнению с другими генотипами . При анализе тонуса периферических сосудов у лиц с нормотонической реакцией статистических значимых различий в зависимости от генотипа выявлено не было (табл.1), а у лиц с гипертонической реакцией наличие генотипа СС сопровождается более высоким ИПС в покое (р<0.05), что может повышать риск развития у них в дальнейшем сосудистых нарушений. У лиц с гипертонической реакцией СДД увеличивалось на 23%, и составило 119,3 мм рт. ст. после нагрузки, в то время как у лиц с нормотонической наблюдался рост только на 9,7% до величины 106 мм рт. ст. Достоверных различий показателей СДД у лиц с разными генотипами выявлено не было.

Таблица 1

Значения исследуемых параметров у лиц с разными генотипами (Ме (25-й ; 75-й перцентили))

Параметры

Гипертоническая реакция

Нормотоническая реакция

Генотип СС

Генотипы СТ и ТТ

Генотип СС

Генотипы СТ и ТТ

NO, мкмоль/л

22,62

(18,15; 29,57)

21,67

(18,75;26,29)

20,54

(19,04;24,70)

22,62

(19,31;30,64)

САД в покое

128

(122; 132)

130 (124;140)

132

(120;142)

130

(124;138)

ДАД в покое

78

(72; 86)

80

(74; 86)

70

(65; 71)*

78

(73; 84)

САД после нагрузки

175

(160; 194)

176

(162-185)

156

(136; 160)

156

(145; 161)

ДАД после нагрузки

90

(82; 96)

95

(90; 100)

74

(66; 85)

80

(74; 90)

ПД в покое, мм рт. ст.

48

(41; 58)

51

(44; 58)

58

(49; 79)*

51

(44; 58)

ПД после нагрузки, мм рт. ст.

90

(76; 98)*

78

(65; 90)

74

(66; 85)

75

(65; 82)

ИПС в покое, уд. ед.

100**

(85,8;102,6)

91

(85,2; 97,5)

80,9

(79,7; 81,6)

85,9

(81,3; 89,5)

ИПС после нагрузки, уд. ед.

108**

(105,7; 122,5)

111

(101,3; 118,5)

87,1

(82.5; 93,5)

89,6

(84.1; 96.1)

* - достоверные различия в зависимости от генотипа (р<0,05); ** - достоверные различия в зависимости о типа реакции (р<0,05)

Выводы

Таким образом, у лиц, имеющих гипертоническую реакцию на нагрузку в 3,5 раза чаще встречался генотип СС промотора гена эндотелиальной синтазы оксида азота. Для лиц с данным генотипом характерен более высокий тонус периферических сосудов. Таким образом, данный аллельный вариант гена можно рассматривать как фактор риска развития периферической вазоконстрикции. Актуальным является дальнейшее проведение исследования, в котором будет изучена взаимосвязь периферической вазоконстрикции с генотипом, причем это должно быть изучение полиморфизма нескольких генов, определяющих функцию эндотелия


Библиографическая ссылка

Бебякова Н.А., Бебякова Н.А., Феликсова О.М., Феликсова О.М., Хромова А.В., Хромова А.В. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ В ИЗУЧЕНИИ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ ВАЗОКОНСТРИКЦИИ // Современные наукоемкие технологии. – 2014. – № 4. – С. 143-145;
URL: http://top-technologies.ru/ru/article/view?id=34589 (дата обращения: 05.04.2020).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074