Исследование проводили in vitro на донорской эритроцитарной массе человека. Эксперимент выполнен в соответствии с требованиями этического комитета ФГБОУ ВПО «Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарева».
Облучение in vitro эритроцитарной взвеси проводили низкоэнергетическим гелий-неоновым лазером ЛГ-78 (клиническая модификация - аппарат «Узор») мощностью 0,02 Вт, дающим монохроматический когерентный красный свет с длиной волны 632,8 нм. Дозы облучения 1,2 Дж/см2, 6 Дж/см2, 12 Дж/см2 и 24 Дж/см2, что соответствует времени экспозиции 1, 5, 10 и 20 мин. Время последействия НЭГНЛ облучения составляет 30 мин, 60 мин, 120 и 180 мин.
Исследование выполнено на рамановском спектрометре in via Basis фирмы Renishaw. Для анализа конформации и О2-связывающих свойств гемоглобина (Гб) использовали следующие полосы КР спектров эритроцитов (указаны положения максимумов): 1580, 1618, 1668 см-1.
При исследовании конформации гемопорфирина гемоглобина интактных эритроцитов крови (не подвергавшихся лазерному воздействию) соотношение КР спектров, показывающих относительное содержание комплексов гемоглобина с NO (1) при отсутствии связи между атомом Fe2+ и глобином, а также относительное содержание комплексов гемоглобина с NO (2) при наличии связи между атомом Fe2+ и глобином составляют 0,35±0,04 отн. ед. и 0,60±0,03 отн. ед. соответственно.
Как показали наши исследования, облучение in vitro эритроцитарной взвеси дозой 1,2 Дж/см2 не вызывает изменения в содержании комплексов гемоглобина с NO при отсутствии (1) и наличии (2) связи между атомом Fe2+ и глобином в эритроцитах (0,36±0,04 и 0,59±0,03 соответственно) по отношению к контролю. В пострадиационный период через 30, 60, 120 и 180 мин после облучения наблюдается увеличение доли комплексов гемоглобина с NO (1) при отсутствии связи между Fe2+ и глобином в эритроцитах на 45,7 % (р<0,05), 40 % (р<0,05), 42,9 % (р<0,05) и 31,4 % соответственно. Доля комплексов гемоглобина с NO (2) при наличии связи между Fe2+ и глобином через 30, 60, 120 и 180 мин после облучения увеличивается на 12,3 % (р<0,05), 19,3 % (р<0,05), 19,3 % (р<0,05) и15,8 % (р<0,05) соответственно.
При облучении взвеси эритроцитов НЭГНЛ дозой 6 Дж/см2 доля комплексов гемоглобина с NO (1) увеличивается на 14,3 % (р<0,05). Доля комплексов гемоглобина с NO (2) увеличивается только на 5 % (р<0,05) по отношению к контролю. В период последействия через 30, 60, 120 и 180 мин после облучения содержание комплексов гемоглобина с NO (1) увеличивается на 31,4 % (р<0,05), 34,3 % (р<0,05), 22,9 % (р<0,05) и 17,1 % (р<0,05) соответственно. Доля комплексов гемоглобина с NO (2) увеличивается на 12,3 % (р<0,05), 19,3 % (р<0,05), 14,0 % (р<0,05) и 12,3 % (р<0,05) соответственно.
Стимуляция эритроцитов НЭГНЛ дозой 12 Дж/см2 вызывает увеличение доли комплексов гемоглобина с NO (1) при отсутствии связи между Fe2+ и глобином на 14,3 % (р<0,05), а содержание доли гемоглобина с NO (2) при наличии связи между Fe2+ и глобином увеличивается на 5,0 % (р<0,05). В пострадиационный период через 30, 60, 120 и 180 мин после облучения доля комплексов гемоглобина с NO (1) увеличивается на 48,6 % (р<0,05), 22,9 % (р<0,05), 40,0 % (р<0,05) и 40,0 % (р<0,05) соответственно. Содержание комплексов гемоглобина с NO (2) через 30, 60, 120 и 180 мин после облучения увеличивается на 21,0 % (р<0,05), 8,8 % (р<0,05), 19,3 % (р<0,05) и 14,0 % (р<0,05) соответственно.
При облучении эритроцитарной взвеси дозой 24 Дж/см2 доля комплексов гемоглобина с NO (1) при отсутствии связи между Fe2+ и глобином увеличивается на 14,3 % (р<0,05), а содержание комплексов гемоглобина с NO (2) при наличии связи между Fe2+ и глобином увеличивается на 5,0 % (р<0,05). Через 30, 60, 120 и 180 мин после облучения доля комплексов гемоглобина с NO (1) увеличивается на 17,1 % (р<0,05), 34,3 % (р<0,05), 25,7 % (р<0,05) и 31,4 % (р<0,05) соответственно. Содержание комплексов гемоглобина с NO (2) через 30, 60, 120 и 180 мин после облучения увеличивается на 12,3 % (р<0,05), 15,8 % (р<0,05), 17,5 % (р<0,05) и 17,5 % (р<0,05) соответственно.
Таким образом лазерное воздействие дозами 6, 12 и 24 Дж/см2 вызывает однотипную реакцию гемопорфирина гемоглобина эритроцитов, которая проявляется в увеличении как доли комплексов гемоглобина с NO (1) при отсутствии связи между Fe2+ и глобином (0,40±0,04; р<0,05), так доли комплексов гемоглобина с NO (2) при наличии связи между Fe2+ и глобином (0,63±0,03; р<0,05). Пострадиационный период носит волнообразный характер, что проявляется в увеличении содержания как комплексов гемоглобина с NO (1), так и доли комплексов гемоглобина с NO (2), что, возможно свидетельствует об адаптационном процессе.
Библиографическая ссылка
Кузьмичева Л.В., Новожилова О.С., Майорова О.А., Мартынова М.И. ИССЛЕДОВАНИЕ СОДЕРЖАНИЯ КОМПЛЕКСОВ ГЕМОГЛОБИН–NO ПРИ ОБЛУЧЕНИИ НИЗКОЭНЕРГЕТИЧЕСКИМ ГЕЛИЙ-НЕОНОВЫМ ЛАЗЕРОМ // Современные наукоемкие технологии. – 2014. – № 10. – С. 123-124;URL: https://top-technologies.ru/ru/article/view?id=34759 (дата обращения: 19.04.2024).