Научный журнал
Современные наукоемкие технологии
ISSN 1812-7320
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,899

ИЗУЧЕНИЕ ПРОТЕКТИВНЫХ СВОЙСТВ ЭРИТРОПОЭТИНА И НИКОРАНДИЛА НА МОДЕЛИ ИШЕМИИ-РЕПЕРФУЗИИ СЕТЧАТКИ

Шабельникова А.С. 1 Кашуба А.С. 1 Пересыпкина А.А. 1 Покровский М.В. 1
1 ФГАОУ ВПО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет»

Цель: изучение протективного действия эритропоэтина и никорандила на модели ишемии-реперфузии глаза.

Методика: Моделирование ишемии-реперфузии сетчатки глаза проводили под наркозом (хлоралгидрат, 300 мг/кг массы тела животного, внутрибрюшинно). Дистантное ишемическое прекондиционирование (ДИП) проводили 10-минутным пережатием бедренной артерии путем наложения жгута на проксимальную треть бедра за 40 мин до моделирования ишемии сетчатки, после чего следовал 30-минутный эпизод реперфузии. Для изучения прекондиционирующего эффекта рекомбинантный эритропоэтин («Эпокрин») вводили внутрибрюшинно в дозе 50МЕ/кг однократно за 30 мин до моделирования ишемии. Никорандил в дозе 0,6 мг/кг («Коронель»), вводили внутрижелудочно за 30 мин до моделирования ишемии. Блокаток К+АТФазных каналов глибенкламид («Манинил») вводили в дозе 5 мг/кг однократно за 60 мин до моделирования ишемии.

Результаты исследования: Через 72 ч. после моделирования патологии коэффициент b/a снижался до 1,2±0,04 отн. ед. (р<0,05) (32 % от исходных значений). На фоне коррекции патологии ДИП коэффициент b/a достоверно возрастал до 2,0±0,08 (р<0,05) по сравнению с группой контроля (табл. 1). При коррекции ишемии эритропоэтином коэффициент b/a в группе составил 2,3±0,06 (р<0,05), никорандилом – 2,2±0,06 (р<0,05), что достоверно отличается от значений в группе контроля. В группах животных которым вводили глибенкламид увеличение показателя b/a не наблюдалось.

Уровень микроциркуляции в сетчатке интактных крыс составлял 743,9±5,0 перфузионных единиц (п.е.), в группе контроля составил 353,3±11,7 п.е. (р<0,001), что свидетельствует о формировании повреждения сетчатки через 72 ч. реперфузии (таблица).

На фоне коррекции патологии ДИП уровень микроциркуляции после 72 ч. реперфузии достоверно возрастает до 638,5±15,8 п.е. (р<0,05) по сравнению с группой контроля. При коррекции патологии сетчатки никорандилом уровень микроциркуляции в группе возрастает до 705,2±15,5 п.е., эритропоэтином до 724,0±4,1 п.е., что достоверно отличается от значений в группе контроля (р<0,001) и стремится к значению в группе интактных животных. Введение глибенкламида в группах с коррекцией ишемических повреждений предотвращало увеличение уровня микроциркуляции.

Толщина внутреннего ядерного слоя сетчатки интактных крыс составила 23,8±1,0 мкм (табл.1). Данный показатель после моделирования ишемии-реперфузии в группе контроля после 72 ч. реперфузии составил 20,3±0,8 мкм, что достоверно отличается от значений в группе интактных животных (р<0,05) и свидетельствует о развитии дегенеративных изменений на данном сроке. На фоне коррекции патологии ДИП толщина слоя составила 21,7±0,4 мкм (р<0,05). При коррекции эритропоэтином данный показатель возрастает до 23,3±0,7 мкм (р<0,05) по сравнению с группой контроля и соотносим со значениями в интактной группе. При коррекции никорандилом также обнаружен протективный эффект слоев сетчатки. Введение глибенкламида в группах с коррекцией предотвращало увеличение толщины внутреннего ядерного слоя за счет устранения эффекта прекондиционирования (таблица). Результаты морфометрии слоя фоторецепторов во всех экспериментальных группах не выявили статистически значимых отличий.

Ретинопротекторные эффекты эритропоэтина и никорандила на модели ишемии-реперфузии сетчатки у крыс (M±m; n=10)

№ п.п.

Экспериментальные группы

Коеффициент b/a, отн.ед.

Уровень микроциркуляции, п.э.

Толщина внутреннего ядерного слоя, мкм

1.

Интактные

2,5±0,1у

743,9±5,0 у

23,8±1,0у

2.

Контроль (ИРС)

1,2±0,04*

353,3±11,7*

20,3±0,8*

3.

ДИП

2,0±0,08*у

638,5±15,8*у

21,7±0,4*у

4.

EPO

2,3±0,06у

724,0±4,1 у

23,3±0,7у

5.

Ник

2,2±0,06*у

705,2±15,5 у

22,9±0,5у

6.

ИРС + Гл

1,2±0,05*

359,4±10,3*

20,5±0,4*

7.

ИРС+ДИП + Гл

1,2±0,04*

361,5±14,3*

20,6±0,6*

8.

ИРС+EPO + Гл

1,2±0,06*

372,7±9,6*

20,3±0,5*

9.

ИРС+Ник + Гл

1,2±0,05*

365,5±11,3*

20,5±0,4*

Примечание. * – р<0,05 в сравнении с группой интактных животных; у – р<0,05 в сравнении с группой контроля; ИРС – ишемия-реперфузия сетчатки; EPO – эритропоэтин, 50МЕ/кг; Ник – никорандил, 0,6 мг/кг; Гл – глибенкламид, 5 мг/кг.

Заключение. Использование метода лазерной доплеровской флоуметрии, морфометрии и электроретинографии позволяет оценить состояние сетчатки и подтвердить протективные свойства эритропоэтина и никорандила на выбранной модели патологии. Подтверждение протективных свойств выбранных агентов за счет прекондиционирующего механизма действия, подтверждается нивелированием эффектов эритропоэтина и никорандила после введения глибенкламида, что доказывает, то, что открытие митохондриальных К+АТФ каналов действует как ведущий механизм в феномене прекондиционирования, индуцированного фармакологически.

Выводы

1. Полученные результаты свидетельствуют о наличии протективных эффектов на модели ишемии-реперфузии глаза рекомбинантным эритропоэтином в дозе 50МЕ/кг и никорандилом в дозе 0,6 мг/кг, заключающихся в достоверном увеличении коэффициента b/a электроретинограммы, достоверном увеличении уровня микроциркуляции и улучшении гистологической картины слоев сетчатки.

2. Введение глибенкламида предотвращало коррекцию ишемических повреждений сетчатки за счет блокады АТФ-зависимых калиевых каналов, что говорит о прекондиционирующем действии эритропоэтина в дозе 50МЕ/кг и никорандила в дозе 0,6 мг/кг на модели ишемии-реперфузии сетчатки.

Работа выполнена при поддержке гранта на проведение научно-исследовательских работ по приоритетным направлениям социально-экономического развития Белгородской области № ГС-06 «Разработка нового подхода к коррекции ишемии сетчатки».


Библиографическая ссылка

Шабельникова А.С., Кашуба А.С., Пересыпкина А.А., Покровский М.В. ИЗУЧЕНИЕ ПРОТЕКТИВНЫХ СВОЙСТВ ЭРИТРОПОЭТИНА И НИКОРАНДИЛА НА МОДЕЛИ ИШЕМИИ-РЕПЕРФУЗИИ СЕТЧАТКИ // Современные наукоемкие технологии. – 2014. – № 10. – С. 76-77;
URL: https://top-technologies.ru/ru/article/view?id=34734 (дата обращения: 28.11.2021).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074