Эпидермальный фактор роста (ЭФР) с успехом локально применяется у больных с термической травмой (ТТ), Один из механизмов протекторного действия ЭФР может быть связан с его влиянием на показатели врожденного иммунитета. Цель работы - исследовать состояние врожденного иммунитета при экспериментальной термической травме в условиях локального применения эпидермального фактора роста.
Материалы и методы исследования. Работа выполнена на 30 белых нелинейных крысах-самцах массой 200-220 г., случайным образом разделенных на 3 группы: I группа - интактные, II группа - модель ТТ, III группа - животные с ТТ, у которых локально применяли ЭФР. ТТ кожи ІІІА степени с площадью ожога 4 % моделировали контактом в течение 30 с с плоскодонным стеклянным стаканом диаметром дна 4 см, наполненным водой с температурой 100 °С. ЭФР применяли в составе препарата «Эбермин» (Центр Генной Инженерии и Биотехнологии, Куба) нанесением на рану 1 раз в сутки в течение 14 дней. Животным II группы на рану наносился препарат «Сульфаргин» (Таллиннский фармацевтический завод). В периферической крови на 1, 3, 7, 14, 28 сутки от термической травмы определяли количество лейкоцитов и лейкоцитарную формулу. Поглотительную способность фагоцитов периферической крови исследовали с использованием частиц монодисперсного полистерольного латекса с вычислением активности фагоцитоза (АФ) и интенсивности фагоцитоза (ИФ), киллинговую способность - в спонтанном и индуцированном теста восстановления нитросинего тетразолия (НСТсп и НСТинд).
Результаты исследования. При экспериментальной ТТ в периферической крови на 3-14 сутки наблюдения фиксируется нейтрофильный лейкоцитоз и лимфоцитопения, а также активация киллинговой и поглотительной способностей фагоцитов. Так, на 3 сутки наблюдения общее количество лейкоцитов увеличилось на 132 % (19,36 ± 1,84·109/л; у интактных 8,34 ± 0,98·109/л; р < 0,001) преимущественно за счет палочкоядерных (1,82 ± 0,29·109/л; у интактных 0,27 ± 0,06·109/л; р < 0,001) и сегментоядерных (10,89 ± 1,04·109/л; у интактных 3,06 ± 0,39·109/л; р < 0,001) нейтрофилов. Нейтрофильный лейкоцитоз в периферической крови сохранялся на 7 сутки ТТ, в это же время снижалось количество лимфоцитов (3,40 ± 0,54·109/л; у интактных 4,16 ± 0,49·109/л; р < 0,01).
На 14 сутки выраженность лимфоцитопении нарастала, количество лимфоцитов снижалось на 33 % от значений контрольной группы (2,79 ± 0,29·109/л; р < 0,01) - это минимальный уровень лимфоцитов в периферической крови за весь период наблюдения. К 21 суткам эксперимента количество лейкоцитов в крови не отличалось от группы интактных, при этом сохранялась нейтрофилия за счет палочкоядерных форм. На 28 сутки ТТ количественный состав лейкоцитов в крови возвращался к уровню интактных животных. На 3 и 7 сутки наблюдался динамичный подъем показателей фагоцитоза. Так, на 7 сутки % клеток, захвативших хотя бы одну частицу латекса, увеличился в 1,3 раза (74,25 ± 2,97 %; у интактных 31,23 ± 2,76 %; р < 0,001), а количество захваченных частиц латекса одним фагоцитом - в 1,06 раза по сравнению с контрольной группой (4,59 ± 0,63 у.е.; у интактных 2,23 ± 0,13 у.е.; р < 0,001). На 14 сутки поглотительная способность фагоцитов снижалась при сравнении с 3 и 7 сутками, но оставалась повышенной при сравнении с интактными животными. К 21 суткам наблюдения АФ возвращалась к уровню интактных животных, но ИФ оставалась повышенной, на 28 сутки количество активно поглощающих фагоцитов, а также количество частиц латекса, поглощенных одним фагоцитом статистически значимо не отличалось от контрольной группы.
Локальное применение ЭФР при экспериментальной ТТ приводит к уменьшению выраженности в периферической крови нейтрофильного лейкоцитоза и коррекции лимфоцитопении, более раннему восстановлению функциональной активности фагоцитов. Первые значимые изменения обнаружены на 3 сутки, когда снижалось количество в крови сегментоядерных нейтрофилов (6,65 ± 0,62·109/л; в контроле 10,89 ± 1,04·109/л; р < 0,001) и общее количество нейтрофилов (7,83 ± 0,73·109/л; в контроле 12,70 ± 1,29·109/л; р < 0,001), кроме того увеличивалось относительное содержание лимфоцитов в лейкоформуле (41,11 ± 2,74 %; в контроле 28,63 ± 1,99 %; р < 0,001). На 7 сутки наблюдения в периферической крови снижалось общее количество лейкоцитов (8,74 ± 0,56·109/л; в контроле 15,30 ± 2,96·109/л; р < 0,001) за счет палочкоядерных (0,46 ± 0,09·109/л; в контроле 2,09 ± 0,66·109/л; р < 0,001) и сегментоядерных (4,08 ± 0,39·109/л; в контроле 8,82 ± 1,68·109/л; р < 0,001) нейтрофилов. На 14 сутки после экспериментальной ТТ отмечено снижение представительства нейтрофилов за счет сегментоядерных форм (4,88 ± 0,71·109/л; в контроле 6,95 ± 0,64·109/л; р < 0,001), а также значимое увеличение количества лимфоцитов (4,64 ± 0,39·109/л; в контроле 2,79 ± 0,29·109/л; р < 0,001). Локальное применение ЭФР не оказывало влияния на количественный состав лейкоцитов и их популяций в крови на 21 и 28 сутки после ТТ. Через 3 суток после ТТ обнаружено статистически значимое снижение поглотительной активности фагоцитов: уменьшалась АФ (59,00 ± 3,29 %; в контроле 74,25 ± 2,97 %; р < 0,001) и ИФ (3,32 ± 0,27 у.е.; в контроле 4,59 ± 0,63 у.е.; р < 0,01), при этом, отмеченные показатели не достигали уровня интактных животных и продолжали оставаться повышенными. В это же время, снижался НСТсп (18,80 ± 2,94 %; в контроле 26,75 ± 2,62 %; р < 0,01), но функциональный резерв фагоцитов, оцениваемый в НСТинд, не изменялся НСТсп (22,44 ± 1,34 %; в контроле 20,25 ± 2,95 %; р< 0,01). На 7 сутки ТТ поглотительная способность фагоцитов у крыс опытной группы также снижалась, причем ИФ достигала значений в группе интактных животных. До уровня интактных животных снижалась активность НСТсп, что отражает восстановление способности фагоцитов к генерации АФК, впрочем, активность НСТинд продолжала оставаться сниженной. Через 14, 21 и 28 суток после индукции ТТ при локальном использовании ЭФР поглотительная и киллинговая способности фагоцитов полностью восстанавливались и не отличались от соответствующих показателей в группе интактных животных.
В целом, полученные результаты свидетельствуют, что локальное применение ЭФР приводит к более раннему восстановлению количественного состава и функциональной активности фагоцитов. Изменение АФ, НСТсп и НСТинд может быть обусловлено падением количества нейтрофилов в периферической крови - основной по количественному составу популяции фагоцитов. Нами обнаружены положительные связи между количеством нейтрофилов в крови и активностью фагоцитоза на 3 сутки (R = 0,39; p < 0,05), 7 сутки (R = 0,54; p < 0,05) и 14 сутки (R = 0,46; p < 0,05) после ТТ, а также между количеством нейтрофилов в крови и НСТсп на 3 сутки (R = 0,31; p < 0,05), 7 сутки (R = 0,37; p < 0,05) и 14 сутки (R = 0,48; p < 0,05) после ТТ. В тоже время, изменение интенсивности НСТ-теста и ИФ свидетельствует о модуляции функциональной активности отдельного фагоцита и отражает снижение стимуляции клеток в ответ на медиаторы воспаления или контакт с поврежденной, а также чужеродной поверхностью. Полагаем, что отмеченные эффекты являются следствием ограничения масштабов альтерации в очаге повреждения и как следствие снижения стимулирующего влияния аутокоидов на миелоидный росток костного мозга, циркулирующие фагоциты и другие мишени в ходе ответа острой фазы.
Таким образом, при экспериментальной ТТ локальное применение ЭФР приводит к снижению выраженности нейтрофильного лейкоцитоза, коррекции лимфоцитопении, снижению поглотительной и спонтанной киллинговой активности фагоцитов на 3-14 сутки наблюдения. Полученные данные расширяют современные представления об иммунорективности организма при ТТ, а также сведения о механизме локального действия ЭФР в очаге ТТ и являются предпосылкой для разработки в комбустиологии новых лекарственных форм как ЭФР, так и других эндогенных иммуномо- дуляторов.
Библиографическая ссылка
Лихачева А.Г., Осиков М.В., Телешева Л.Ф. Влияние локального применения эпидермального фактора роста на показатели врожденного иммунитета при экспериментальной термической травме // Современные наукоемкие технологии. – 2012. – № 9. – С. 48-50;URL: https://top-technologies.ru/ru/article/view?id=30910 (дата обращения: 23.11.2024).