Научный журнал

Современные наукоемкие технологии

ISSN 1812-7320

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 0,940

• Авторы
• Резюме
• Файлы
• Ключевые слова

Д .А. Клюев Е .А. Колесникова Л.Е. Муравлева Luchansky М.С. Курманов Л.Ж. Оспанова Л. Ж .Аймышева

Изучено содержание катаболитов и ферментов пуринового обмена в крови больных хроническим гломерулонефритом (Гн). Установлено, что изменение их содержания не связано с процессами катаболизма. не выявлено корреляционных связей между содержанием изучаемых катаболитов и активностью ферментов пуринового обмена (активность ада и индекс Кс/ГКс, отражающий активность первой фазы воздействия ксантиноксидазы). Предложена гипотеза ответственности нарушения транспорта нуклеотидов или блокирования их захвата клетками крови за изменение нормальных значений концентрации продуктов пуринового метаболизма в плазме крови больных Гн

Статья в формате PDF

418 KB

обмен пуринов

гломерулонефрит

purine metabolism

glomerulonephritis

В этой связи очевидной становится необходимость более детального изучения этапов генерации мочевой кислоты, что возможно только при исследовании изменений содержания всех метаболитов пуринового обмена.

Цель исследования

Изучение катаболитов и ферментов пуринового обмена в крови больных хроническим гломерулонефритом (гН).

Материалы и методы

В качестве объекта исследования использовалась венозная кровь 25 больных с хроническим  гломерулонефритом  (гН). Проводилось определение содержания интермедиатов пуринового обмена (гуанина (г), гипоксантина (гКс), аденина (А), ксантина (Кс) и мочевой кислоты (МК)) в плазме крови, а также активности аденозиндезаминазы (АДА) в эритроцитах больных гН. Метаболиты пуринового обмена исследовались по методу Е.В. Орешникова и соавторов (2008) [3]. Содержание МК оценивали с помощью ферментативного (уриказного) метода, используя диагностические наборы. Концентрацию пуриновых оснований выражали в единицах экстинкции (ед.экст.), МК - в мкмоль/л. Активность АДА определяли по методу И.Б. Немечек и соавт. [4] и выражали в нмоль аденозина/мл эритроцитов/мин. Статистический анализ полученных данных проводился с использованием пакета прикладных программ STATISTICA (версия 7.0) с учетом вычислительных методов, рекомендуемых для биологии и медицины. Анализ полученных данных включал расчет средней арифметической вариационного ряда (М) и ее ошибки (m). Для выявления взаимосвязей между изучаемыми показателями и установления силы этих связей рассчитывались коэффициенты парной корреляции Пирсона (r).

Результаты и обсуждение

Результаты исследования содержания интермедиатов пуринового обмена в крови больных гН представлены в таблице 1. Анализ этих данных показывает, что в крови больных гН отмечается существенное изменение содержания интермедиатов пуринового обмена в сравнении с референсными значениями. В частности, установлено повышение концентрации аденина и гуанина на 50-98%, а гипоксантина в 1,47 раза выше контрольных значений. Последний является продуктом и - соответственно - маркером катаболизма аденина и аденозина. Содержание ксантина в плазме крови больных гН превышало  контрольные  показатели в 1,51 раза. При этом концентрация конечного продукта пуринового обмена - мочевой кислоты, не превышала нормальных значений. Активность АДА в эритроцитах больных гН достоверно от контроля не отличалась.

Для определения активности ксантиноксидазы, на различных этапах катализирующей окисление гипоксантина в ксантин и ксантина в МК, были рассчитаны соотношения их концентраций. Как видно из таблицы 1, индексы Кс/гКс, МК/гКс и МК/Кс, отражающие активность ксантиноксидазы, не выходят за рамки референсных значений, характерных для здоровых доноров.

Анализируя весь объем данных, полученных при исследовании интермедиатов и ферментов пуринового обмена, мы можем выделить несколько особенностей, характерных для больных гН. Во-первых, не отмечается повышения в плазме крови концентрации конечного продукта катаболизма пуринов - МК, хотя содержание всех остальных интермедиатов повышено в 1,5 раза относительно контроля. Во-вторых, активность ферментов, лимитирующих катаболизма пуринов, не превышает норму. Исходя из этого, можно предполагать, что изменение содержания продуктов пуринового обмена в крови больных гН не связано с их катаболизмом. Скорее всего, этот феномен обусловлен нарушением транспорта пуринов и их захвата из плазмы клетками крови [1].

Таблица 1. Концентрация различных продуктов пуринового обмена в плазме крови и активность АДА в эритроцитах больных ГН (M+m)

Для выявления взаимосвязей между изучаемыми  показателями  и установления силы этих связей были рассчитаны коэффициенты парной корреляции Пирсона (r). результаты парного корреляционного анализа представлены в таблице 2.

Анализ коэффициентов корреляции показывает высокую степень взаимозависимости

Результаты парного корреляционного анализа (r-коэффициенты Пирсона) показателей пуринового обмена у больных ГН с уровнем значимости p<0,05

показателей пуринового обмена между собой. Не было выявлено зависимости содержания пуринов, продуктов их катаболизма и активности АДА в эритроцитах. При этом были получены значительные коэффициенты корреляции с высоким уровнем значимости между активностью АДА и индексами, характеризующими активность ксантиноксидазы (Кс/гКс и МК/Кс). Эти данные также подтверждают наше предположение об отсутствии зависимости содержания пуриновых метаболитов от активности лимитирующих ферментов. Поскольку основным источником гипоксантина является распад аденозина, а ксантин образуется при распаде и аденозина, и гуанина, индексы Кс/г и Кс/гКс также отражают вклад катаболизма аденина и гуанина в изменение содержания промежуточных продуктов пуринового обмена.

Из данных, представленных в таблице 2, следует, что изменение индекса Кс/г определяется в первую очередь изменением содержания гуанина,  т.к. корреляционных связей между данным индексом и содержанием ксантина не выявлено. При этом выявлены сильные связи между индексом Кс/г, активностью  АДА (которая  не участвует в катаболизме гуанина) и содержанием гипоксантина (являющимся продуктом катаболизма аденозина). Для того, чтобы определить вклад изменений катаболизма гуанина и аденина в общее изменение содержания продуктов обмена пуринов, было выделено две группы больных. В первую группу вошли 13 больных гН, с индексом Кс/гКс < 1, что предполагает более высокую скорость образования гипоксантина, т.е. более высокий вклад катаболизма аденозина. Во вторую группу вошли 12 больных гН, с индексом Кс/гКс > 1, что предполагает меньший вклад катаболизма аденозина.

Для каждой группы были вновь рассчитаны коэффициенты парной корреляции Пирсона (r). результаты парного корреляционного анализа представлены в таблицах 3 и 4.

Из данных таблицы 3 следует, что у больных гН с индексом Кс/гКс меньше 1 не выявляется корреляций между изменением содержания катаболитов пуринового обмена и индексами Кс/гКс и Кс/г. Также не отмечалось наличия корреляций между изменением активности АДА в эритроцитах этих больных и остальными показателями. Количество МК и ксантина не зависело от содержания гуанина, хотя выявлялись сильные корреляционные связи между показателями катаболитов аденозинового каскада. Это позволяет предположить, что изменение концентрации продуктов пуринового обмена у больных этой группы обусловлено колебаниями интенсивности обмена аденозина и уменьшением их захвата эритроцитами с последующим окислением.

Анализ данных, представленных в таблице 4, показал, что содержание катаболитов пуринового обмена в плазме крови больных гН с индексом Кс/гКс больше 1 также не имеет статистически значимых взаимосвязей с активностью АДА. Взаи

Таблица 3. Результаты парного корреляционного анализа (r коэффициенты Пирсона) показателей пуринового обмена больных ГН с индексом Кс/ГКс < 1 (уровень значимости p<0,05)

мозависимость показателей содержания всех катаболитов пуринового обмена была более выраженной в сраввнении с первой группой. Наличие сильных корреляционных связей (0,91-1,00) позволяет с высокой степенью вероятности предполагать, что изменение содержания интермедиатов пуринового обмена в плазме крови больных данной группы вызвано каким-то одним процессом.

Отсутствие таких корреляционных связей между содержанием изучаемых катаболитов и активностью ферментов пуринового обмена (активность АДА и индекс Кс/ гКс,  отражающий активность первой фазы воздействия ксантиноксидазы) позволяет  предположить,  что этот  процесс не связан с изменением активности ферментов пуринового каскада. Однако именно он обеспечивает высвобождение свободных

Результаты парного корреляционного анализа (r коэффициенты Пирсона) показателей пуринового обмена больных ГН с индексом Кс/ГКс > 1 (уровень значимости p<0,05)

нуклеотидов и азотистых оснований с последующим их окислением. Одним из таких процессов может быть, например, процесс разрушения нуклеиновых кислот.

В качестве гипотезы можно предложить на роль таких процессов нарушение транспорта  нуклеотидов,  блокирование  их захвата клетками крови и т.д. Именно на этом направлении, на наш взгляд, необходимо сосредоточить дальнейший поиск причин прогредиентного развития гломерулонефрита.

Список литературы

1. Маданов И.В. лабораторный анализ важнейших показателей пуринового обмена - чебоксары, 1998. - С. 2-28.
2. Наточина Н.Ю. //российский вестник перинатологии и педиатрии. - 1999. - N6. - С.41-46.
3. Орешников Е.В. и соавт. // Проблемы репродуктологии. - 2008. - № 6. - С. 74- 80.
4. Немечек И.Б. и соавт. //Вопр. мед. химии - 1993. - № 4. - С. 16-22.

Библиографическая ссылка