Известно, что нативная сыворотка крови здоровых мужчин и женщин [1], а также рожениц и пуповинной крови новорожденных [3] способна повышать вазоконстрикторный эффект адреналина, т.е. проявлять альфа-адреносенсибилизирующую активность. Это объясняется наличием в крови эндогенного сенсибилизатора альфа-адренорецепторов (ЭСААР). Цель данной работы - оценить сохранность ЭСААР-активности сыворотки крови после 6-месячного её хранения при минусовой температуре (-10оС).
Методика. В работе использовали 104-, 103-, 500-, 100- и 50-кратные разведения размороженной сыворотки венозной крови 4 мужчин и 4 женщин 40-50 лет. Оценку ЭСААР-активности проводили по методике [3], используя в качестве тест-объекта 83 полоски (6-8 х 2-3 мм), циркулярно иссеченных из почечной артерии коровы (n=4). Регистрацию сократительной активности полосок проводили по методике [2] на «Миоцитографе» при 37оС. Альфа-адренореактивность полосок оценивали по тонотропному эффекту адреналина (10-6 г/мл) на фоне блокады бета-адренорецепторов (АР) обзиданом (10-6 г/мл). Часть исследований проводилась на полосках с интактным эндотелием (спустя 1-2 часа после забоя животного), а часть - с удалением эндотелия (через сутки). Различия оценивали по критерию Стьюдента, считая их достоверными при p<0,05.
Результаты. Адреналин повышал тонус полосок (табл.), что обусловлено активаций альфа-АР. Сыворотка крови в разведениях 1:104, 1:103, 1:500 не вызывала изменения адреналин-вызванного тонуса полосок, а в разведениях 1:100 и 1:50 вызывала достоверное его повышение (до 128,0% и 135,6% от исходного уровня соответственно). После удаления сыворотки крови повышенный тонус сохранялся. Нами также показано, что эффекты сыворотки не зависели от состояния эндотелия, т.е. от продукции оксида азота и других факторов, продуцируемых эндотелием.
Выводы. Результаты исследования подтверждают ранее полученные в нашей лаборатории данные [1,3] о наличии в крови ЭСААР. Можно также утверждать, что ЭСААР-активность сыворотки крови сохраняется в условиях длительного хранения её при минусовой температуре, что расширяет методические возможности её изучения.
Таблица 1. Величина тонуса (М±m) циркулярных полосок почечной артерии коровы при действии адреналина (10-6 г/мл) и 5 разведений сыворотки крови человека
|
Разведение сыворотки крови |
Число наблю- дений |
Этапы эксперимента ( на фоне обзидана, 10-6 г/мл) |
||||
|
1 этап - адреналин |
2 этап - Адреналин + сыворотка крови |
3 этап - адреналин |
||||
|
мН |
мН |
% к 1 этапу |
мН |
% к 1 этапу |
||
|
1:104 |
3 |
5,9±1,1 |
5,6±1,2 |
94,4±5,6 |
5,6±1,2 |
94,4±5,6 |
|
1:103 |
13 |
14,3±2,4 |
13,8±2,5 |
98,3±6,5 |
15,5±2,5 |
113,4±8,7 |
|
1:500 |
21 |
15,7±1,4 |
16,9±1,7 |
106,2±5,4 |
16,2±1,9 |
102,4±7,4 |
|
1:100 |
25 |
16,0±1,5 |
19,9±1,6 |
128,0±5,0* |
19,4±2,1 |
122,8±8,6* |
|
1:50 |
21 |
15,3±2,3 |
19,5±2,8 |
135,6±9,2* |
19,6±2,7 |
137,6±9,8* |
* - различия достоверны по сравнению с 1 этапом эксперимента, Р<0,05
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ:
- Снигирева Н.Л., Тарловская Е.И., Кашин Р.Ю., Циркин В.И. Влияние сыворотки крови больных с артериальной гипертензией на адренореактивность гладких мышц почечной артерии коровы //Артериальная гнипертензия.- 2006. Т.12. Приложение. С. 78.
- Циркин В.И., Дворянский С.А., Ноздрачев А.Д. и др. Повышение β-адренореактивности коронарных артерий под влиянием сыворотки крови // Доклады РАН.- 1996.- Т. 351, № 4. - C. 565-566.
- Циркин В.И., Ноздрачев А.Д., Сазанова М.Л., Дворянский С.А. Физиологические свойства миоцитов артерий и вены пуповины человека и влияние на них сыворотки пуповнной крови // Доклады РАН. -2003- Т. 388, № 3. - С. 426-429.