В связи с вышеизложенным, целью настоящего исследования было изучить влияние ацетата ртути в различных концентрациях на активность фермента аланинтрансаминазы (К.Ф. 2.6.1.2.). Аланинтрансаминаза (АлАТ) катализирует реакцию трансаминирования между аланином и a-кетоглутаратом. Локализован этот фермент в цитозоле клеток многих органов, но наибольшее его количество обнаружено в клетках печени. В результате работы этого фермента азот многих аминокислот переходит в состав глутамата. Это очень важно, т.к. только глутамат в тканях млекопитающих подвергается прямому окислительному дезаминированию с выделением молекулы аммиака, и последующим удалением его из организма в виде мочевины. Нарушение реакций трансаминирования аминокислот приводит к нарушению обмена аминокислот и белков организма.
Материалом исследования служила сыворотка крови, полученная от практически здоровых женщин в возрасте 21-35 лет. Исследовали изменение активности АлАТ (in vitro) под действием ацетата ртути в концентрациях: 10-3 и 10-6моль/л. Условия проведения эксперимента: определяли активности фермента сразу после внесения вещества в сыворотку крови, а затем пробы инкубировали при температуре 36,6-36,8 °С (приближено к физиологическим условиям), и определяли активность каждые 30 минут от начала эксперимента в течение пяти часов. Определение активности АлАТ проводили с помощью набора реагентов производства фирмы «Лахема» (Чехия); активность выражали в мккат/л.
В результате проведенного опыта установлено, что активность фермента в интактной сыворотке составила в среднем 0,223 ± 0,012 мккат/л (в норме активность фермента составляет 0,120-0,880 мккат/л), и достоверно не изменялась в течение эксперимента. Достоверное снижение активности АлАТ (p≥99%) отмечали сразу после внесения ацетата ртути в концентрации 10-3моль/л - на 36%, а через 30 минут - на 62% (0,186 ± 0,013 мккат/л и 0,086 ± 0,012 мккат/л соответственно). Причем через 30 минут активность падала ниже нормальных показателей. При дальнейшем наблюдении отмечали снижение активности фермента и к концу эксперимента она достигла 0,022±0,007 мккат/л.При внесении ацетата ртути в концентрации 10-6моль/л - достоверное ингибирование активности фермента (p≥95%) отмечали спустя 4 часа от начала эксперимента. Активность фермента в этом случае снизилась на 17% (0,136 ± 0,012 мккат/л) и имела дальнейшую тенденцию к снижению.
Таким образом, наше исследование выявило ингибирующее влияние ацетата ртути на активность аланинаминотрансферазы. Причем этот эффект отмечается как в высокой (10-3моль/л), так и в низкой (10-6моль/л) концентрации испытуемого эндотоксиканта, различия заключаются в степени ингибирования и времени проявления эффекта.