Целью данной работы явилось изучение в сравнительном аспекте морфологических особенностей культивированных МЛ периферической крови здоровых доноров и костного мозга больных острым миелоидным лейкозом (ОМЛ).
Проведены исследования пунктатов костного мозга детей больных ОМЛ, полученных в период бластного криза (при уровне бластоза не менее 80 %). Индукция ДК в крови здоровых доноров производилась путём введения им нейпогена (полипептида, стимулирующего пролиферацию и дифференцировку МЛ). Культивирование мононуклеаров производили как без добавления ростовых факторов, так и при коинкубации МЛ с гранулоцит - макрофаг - колониестимулирующим фактором (ГН - КСФ) и интерлейкином - 4 (ИЛ - 4) в течение 6 - 10 суток. Из взвеси и прилипших ко дну культурального сосуда клеток делали мазки, которые окрашивали азуром ІІ - эозином по Романовскому - Гимза, метиловым зелёным - пиронином по Браше на РНК с контрольной обработкой РНК - зой, реактивом Шиффа по Шабадашу с контролем амилазой. Затем учитывался их количественный и качественный состав.
Морфологические исследования показали, что в культурах клеток костного мозга больных ОМЛ, инкубированных без добавления ростовых факторов преобладали бластные формы (19%), содержащие пиронинофильный компонент в ядрышках и цитоплазме, окрашивающиеся также ШИК - положительно и незрелые клетки миелоидного ряда. В мазках культуральной взвеси практически не определялись ДК (0,8 %). В культурах МЛ периферической крови здоровых доноров в аналогичных условиях на 10 сутки отмечалось большее число бластных клеток (33%), так и ДК (17%) по сравнению с культурами костного мозга больных.
Мононуклеары, полученные при добавлении в культуральную среду костного мозга ГМ - КСФ и ИЛ - 4, характеризовались рядом особенностей. Через 10 суток в культурах наряду с молодыми клетками миелоидного ряда и бластными формами (53%) определялись ДК различной степени зрелости (30%). Цитоплазма зрелых ДК была более ШИК - положительной, с повышенным количеством РНК, о чем свидетельствовала её яркая пиронинофилия. При коинкубации МЛ периферической крови доноров с ГМ - КСФ и ИЛ - 4 через 10 суток в мазках культуральной взвеси число бластных форм было меньшим (15%), а количество дендритных клеток возрастало (48%) в отличие от мазков костного мозга больных ОМЛ.
Таким образом, результаты исследования показали, что, несмотря на выявленную в опытах возможность генерации дендритных клеток из бластных форм больного ОМЛ при стандартном наборе цитокинов (ГМ - КСФ и ИЛ - 4), число их значительно уступает количеству ДК в культурах периферической крови здоровых доноров, получавших нейпоген.
Библиографическая ссылка
Лебединская О.В., Мелехин С.В., Шубина И.Ж., Киселевский М.В., Фадеева Е.В. МОРФОЛОГИЯ МОНОНУКЛЕАРНЫХ ЛЕЙКОЦИТОВ В КУЛЬТУРАХ КРОВИ ЗДОРОВЫХ ДОНОРОВ И КОСТНОГО МОЗГА БОЛЬНЫХ ОСТРЫМ МИЕЛОИДНЫМ ЛЕЙКОЗОМ // Современные наукоемкие технологии. – 2005. – № 7. – С. 49-49;URL: https://top-technologies.ru/ru/article/view?id=23387 (дата обращения: 21.11.2024).