Препараты пептидной природы, обладающие общесистемными и антигипоксическими свойствами, широко используются при лечении сердечно-сосудистых заболеваний. Одним из них является дельтаран [5,6].
В связи с этим, целью данной работы явилось исследование влияния дельтарана на активность глутатионпероксидазы и каспазы-3 в мозге крыс в разные сроки ИМ.
Эксперимент проводили на 80 белых беспородных крысах-самцах массой 200-250 г, содержавшихся в стандартных условиях вивария. Инфаркт миокарда (ИМ) моделировали методом O.Tarnavski et al. путем лигирования коронарной артерии в условиях атропиновой предмедикации перед барбамиловым наркозом [9].
Животные были разделены на X групп: I - контрольная группа (ложнооперированные животные) (n=8); во II-V группах - моделировали ИМ и спустя, соответственно, 1-е, 3-и, 7-е и 14-е сутки животных декапитировали (n=32); VI - ложнооперированным животным внутрибрюшинно вводили дельтаран в дозе 12 мкг/100 г массы тела (n=8); в VII-X группах - за 1 час до моделирования инфаркта миокарда животным внутрибрюшинно вводили дельтаран в дозе 12 мкг/100 г массы тела, а через, соответственно, 1-е, 3-и, 7-е и 14-е сутки крыс декапитировали (n=32).
В структурах головного мозга определяли активность каспазы-3 флюориметрическим методом [8] и активность глутатионпероксидазы (ГПО) [1].
Согласно полученным результатам, на 1-е сутки ИМ в коре больших полушарий и стволовых структурах активность каспазы-3 значительно увеличивается, соответственно, на +171% (р<0,01) и + 341% (р<0,01). Одновременно наблюдалось повышение уровня ГПО в стволовых структурах на +29% (р<0,05) относительно группы ложнооперированных животных (табл.1).
На 3-и сутки после лигирования коронарной артерии активность каспазы-3 возросла в гемисфере коры на +51% (р<0,05), а в стволовых структурах на +136% (р<0,01) и увеличился уровень ГПО, соответственно, на +50% (р<0,05) и +152% (р<0,01) по сравнению с контролем.
На 7-е сутки ИМ уровень каспазы-3 не изменялся. Одновременно, наблюдалось повышение активности ГПО в стволовых структурах на +29% (р<0,05) и в коре больших полушарий на +31% (р<0,05) относительно контроля.
Введение дельтарана ложнооперированным животным привело к повышению каспазной активности в стволовых структурах на +61% (р<0,05) и ГПО в гемисфере коры на +73% (р<0,05) по сравнению с контролем.
На 1-е сутки после инфарцирования в условиях предварительного введения дельтарана в коре больших полушарий и стволовых структурах произошло увеличение активности каспазы-3, соответственно, на +21% (р<0,05) и 59% (р<0,05), с одновременным повышением уровня ГПО в гемисфере коры на +111% (р<0,05) относительно контроля.
В гемисфере коры и стволовых структурах VIII группы животных произошло увеличение каспазной активности, соответственно, на +152% и +107%, а уровень ГПО возрос в коре больших полушарий (150%; р<0,01) и понизился в стволовых структурах (-55%; р<0,05) по сравнению с контролем.
На 7-е сутки ИМ в условиях предварительного введения дельтарана в коре больших полушарий и стволовых структурах активность каспазы-3 повысилась, соответственно, на +167% (р<0,01) и 86% (р<0,05). Также происходило повышение уровня ГПО в гемисфере коры на +76% (р<0,05) и его снижения в стволовых структурах на -41% (р<0,05) относительно I группы.
Предварительное введение дельтарана животным X группы привело к увеличению каспазной активности в коре больших полушарий и стволовых структурах, соответственно, на +77% (р<0,05) и +44% (р<0,05). Одновременно, наблюдалось повышение уровня ГПО в гемисфере коры на +48% (р<0,05) и понижение в стволовых структурах на -33% (р<0,05) относительно контроля.
Таким образом, неспецифической реакцией на ИМ является повышение каспазной активности в структурах мозга на 1-е сутки заболевания. Тогда как активность ГПО возрастает в подострый период ИМ (3-и, 7-е сутки), особенно в стволовых структурах, что вероятно, и приводит к снижению активности проапоптотичесого фермента до уровня контроля.
Предварительное введение дельтарана перед операцией снижает влияние ИМ на активность каспазы-3 на 1-е сутки заболевания. Это сопровождается увеличением активности ГПО только в коре больших полушарий. Тогда как в подострый период ИМ, напротив, отмечается возрастание активности каспазы-3 и ГПО в гемисферах коры. В стволовых же структурах в данные сроки развития заболевания не столь значительное повышение активности проапоптотичесого фермента сопровождается понижением активности ГПО, вероятно за счет опосредованного дельтараном понижения интенсификации СРП. В период рубцевания (14-е сутки ИМ) активность, как каспазы-3, так и ГПО, значительно превышает контрольные значения только в коре больших полушарий.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ:
- Арутюнян А.В., Дубинина Е.Е., Зыбина Н.Н. Методы оценки свободнорадикального окисления и антиоксидантной системы организма. - СПб.: ИКФ "Фолиант". - 2006. - 104 с.
- Голиков А.П., Давыдов Б.В., Руднев Д.В. // Кардиология. - 2005. - №7. - С. 21-26.
- Ким А.В., Джимбаладзе Д.Н., Семеновский М.Л. // Неврол.ж. - 2004. - №6. - С. 11-15.
- Ланкин В.З., Тихазе А.К., Беленков Ю.Н. // Кардиология. - 2000. - №7. - С. 48-61.
- Ульянинский Л.С., Архангельская М.И., Звягинцева М.А. и др.
Экспериментальная и прикладная физиология. Психоэмоциональный стресс. Труды научного совета по экспериментальной и прикладной физиологии. - 1992. - Т.1. - С. 86-102. - Ульянинский Л.С., Иванов В.Т., Михалева И.И. //Космическая биология и авиакосмическая медицина.- 1990. - №3. - С. 23-28.
- Фильченков А.А. //Биохимия. - 2003. - Т. 68, вып. 4. - С. 453-466.
- Яковлев А.А., Перегуд Д.И., Павлова Т.В., Гуляева Н.В. // Нейрохимия. - 2004. - Т. 21, №1. - С. 58-67.
- Tarnavski O., McMullen J.R., Schinke M et al. // Physiol. Genomics. - 2004. - Vol. 16. - P. 349-360.
Таблица 1. Активность каспазы-3 (пмоль/мин/мг.белка) и ГПО (мкмоль/мин/г белка) в мозге крыс при ИМ (M ± m)
|
Группы |
Каспаза-3 |
ГПО |
||
|
Гемисфера коры |
Стволовые структуры |
Гемисфера коры |
Стволовые структуры |
|
|
I группа Контроль,ложнооперированные |
3,6 |
2,85 |
23,94 |
48,95 |
|
II группа 1 сутки инфаркта |
9,75 ± 0,51* |
12,58 ± 0,63* |
27,67 |
62,92 ± 2,92* |
|
III группа 3 сутки инфаркта |
5,43 ± 0,25* |
6,72 ± 0,32* |
35,81 ± 1,71* |
123,27 ± 5,97* |
|
IV группа 7 сутки инфаркта |
3,14 |
3,21 |
31,29 ± 1,55* |
63,26 ± 3,14* |
|
V группа 14 сутки инфаркта |
3,36 |
3,03 |
21,9 |
39,24 |
|
VI группа Ложная операция +Дельтаран |
3,92 |
4,6 ± 0,25* |
41,42 ± 2,03* |
40,81 |
|
VII группа Дельтаран + 1 сутки инфаркта |
4,36 ± 0,22* |
4,52 ± 0,20* |
50,42 ± 2,51* |
38,23 |
|
VIII группа Дельтаран + 3 сутки инфаркта |
9,06 ± 0,46* |
5,91 ± 0,31* |
59,65 ± 2,83* |
22,09 ± 0,98* |
|
IX группа Дельтаран + 7 сутки инфаркта |
9,61 ± 0,43* |
5,3 ± 0,26* |
42,21 ± 2,10* |
28,79 ± 1,25* |
|
X группа Дельтаран + 14 сутки инфаркта |
6,36 ± 0,28* |
4,11 ± 0,26* |
35,5 ± 1,63* |
32,68 ± 1,65* |
Условные обозначения: * - достоверные отличия относительно контроля